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J Biotechnol:南京农业大学喻德跃课题组用基因组编辑技术对大豆高效定向诱变
文/admin      2015/12/01

  11月19日,《JouRNAl of Biotechnology》发表南京农业大学喻德跃课题组的一项研究,研究利用TALENs和CRISPR/Cas9两种基因组编辑技术,在大豆中实现了高效的定向诱变,并对TALENs、使用atu6-26promoter 的CRISPR/Cas9和使用gmu6-16g-1promoter的CRISPR/Cas9三种技术的打靶效率,进行了比较分析,指出GmU6-16g-1是大豆sgRNA表达的一种合适的U6promoter。
 
  基因打靶(GT)对于推进基础植物学研究和作物改良,具有重要的意义。TALENs和CRISPR/Cas9系统已被开发用于真核生物的基因组编辑,包括植物。在这项研究中,研究人员对两个大豆基因组编辑靶标——GmPDS11和GmPDS18,进行了这两种技术的比较分析。研究人员发现,对于大豆毛状根中的基因打靶,利用TALENs技术的单个打靶效率范围在17.5%至21.1%,而使用AtU6-26promoter的CRISPR/Cas9效率范围在11.7%到18.1%,使用GmU6-16g-1promoter的CRISPR/Cas9效率范围在43.4%至48.1%,从而表明,相比较他技术而言,使用gmu6-16g-1promoter的CRISPR/Cas9,可能是一种更有效的工具。
 
  同样的,研究人员对着三种技术进行的双突变GT效率实验显示,TALENs的打靶效率为6.25%,使用atu6-26promoter 的CRISPR/Cas9打靶效率为12.5%,使用gmu6-16g-1promoter的CRISPR/Cas9打靶效率为43.4%至48.1%,从而表明,CRISPR/Cas9仍是同时编辑多个同源等位基因(homoeoallele)的一个更好选择。而且,研究人员在子叶节点中观察到了大豆转化引起的白化和矮芽(PDS基因敲除)。
 
  总而言之这些研究结果表明,TALENs和CRISPR/Cas9系统是大豆基因组编辑的一种强大工具。而且,GmU6-16g-1是大豆sgRNA表达的一种合适的U6promoter。
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